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化妆品的微生物检测

1.取样:

对于亲水性样品,直接称取10g或者量取10mL样品加入到90mL灭菌生理盐水中,充分振荡均匀待检;对于疏水性样品,需先称取10g样品研碎或者量取10mL液体样品,然后加入到10mL灭菌液体石蜡中混匀,再加入10mL灭菌吐温80,混匀待溶解后,最后加入70mL灭菌生理盐水混匀后待检。

2.菌落总数:

此项目便于判明样品被污染的程度,是对样品进行卫生学总评价的综合依据。具体操作为取上述待检液2mL,分别注入两个灭菌平皿内,每皿1mL,将融化并冷至45-50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内,每皿约15mL,随即转动平皿,待琼脂凝固后,翻转平皿,置36℃培养箱内培养48h后计数。

3.粪大肠菌群:

该菌直接来自粪便,是重要的卫生指示菌。操作方法为取10mL待检液,加入到10mL双倍乳糖胆盐(含中和剂)培养基中,置44℃培养箱中培养24-48h,如不产酸也不产气,则报告为粪大肠菌群阴性;如产酸产气,划线接种到伊红美蓝琼脂平板上,置36℃培养18-24h,经培养后观察菌落形态,如有深紫黑色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,具有金属光泽的菌落或者紫黑色,不带或略带金属关泽,或粉紫色,中心较深的菌落,应进一步做革兰染色镜检和靛基质试验,菌落典型,革兰氏阴性短杆菌,靛基质试验阳性则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。

4.铜绿假单胞菌:

该菌对人有致病力,可使伤处化脓,引起败血症等。检测时将待检液10mL加到90mLSCDLP液体培养基中,置36℃培养18-24h,如有铜绿假单胞菌生长,培养液表面多有一层菌膜,培养液常呈黄绿色或蓝绿色。然后从培养液的薄膜处挑取培养物,划线接种在十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上,置36℃培养18-24h ,如出现扁平无定型,向周边扩散或略有蔓延,表面湿润,呈灰白色,菌落周围培养基常扩散有水溶性色素的菌落时,进一步革兰染色为革兰阴性杆菌,氧化酶及绿脓菌素试验阳性者,即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。

5.金黄色葡萄球菌:

该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种,能引起人体局部化脓性病灶,严重时可导致败血症。检测方法为取10mL待检液加到90mLSCDLP液体培养基中,置36℃培养24h,然后划线接种在Baird Parker氏培养基,置36℃培养48h,如有光滑,凸起,湿润,直径为2-4mm,颜色呈灰色到黑色,边缘为淡色,周围为一浑浊带,在其外层有一透明圈的菌落,经革兰染色镜检,证明为革兰氏阳性葡萄球菌,并能发酵甘露醇,血浆凝固酶试验阳性者,可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。

6.霉菌和酵母菌:

该项目用于判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。检测方法为取待检样液2mL,分别注入两个灭菌平皿内,每皿1mL,将融化并冷至45℃的虎红培养基倾注到平皿内,每皿约15mL,随即转动平皿,待琼脂凝固后,翻转平皿,置28℃培养箱内培养72h后计数。

  • 13712228533 杨生

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