1.取样：

对于亲水性样品，直接称取10g或者量取10mL样品加入到90mL灭菌生理盐水中，充分振荡均匀待检；对于疏水性样品，需先称取10g样品研碎或者量取10mL液体样品，然后加入到10mL灭菌液体石蜡中混匀，再加入10mL灭菌吐温80，混匀待溶解后，最后加入70mL灭菌生理盐水混匀后待检。

2.菌落总数：

此项目便于判明样品被污染的程度，是对样品进行卫生学总评价的综合依据。具体操作为取上述待检液2mL，分别注入两个灭菌平皿内，每皿1mL，将融化并冷至45℃-50℃的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基倾注到平皿内，每皿约15mL，随即转动平皿，待琼脂凝固后，翻转平皿，置36℃培养箱内培养48h后计数。

3.粪大肠菌群：

该菌直接来自粪便，是重要的卫生指示菌。操作方法为取10mL待检液，加入到10mL双倍乳糖胆盐（含中和剂）培养基中，置44℃培养箱中培养24-48h，如不产酸也不产气，则报告为粪大肠菌群阴性；如产酸产气，划线接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36℃培养18-24h，经培养后观察菌落形态，如有深紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，具有金属光泽的菌落或者紫黑色，不带或略带金属关泽，或粉紫色，中心较深的菌落，应进一步做革兰染色镜检和靛基质试验，菌落典型，革兰氏阴性短杆菌，靛基质试验阳性则可报告被检样品中检出粪大肠菌群。

4.铜绿假单胞菌：

该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血症等。检测时将待检液10mL加到90mLSCDLP液体培养基中，置36℃培养18-24h，如有铜绿假单胞菌生长，培养液表面多有一层菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。然后从培养液的薄膜处挑取培养物，划线接种在十六烷三甲基溴化铵琼脂平板上，置36℃培养18-24h ，如出现扁平无定型，向周边扩散或略有蔓延，表面湿润，呈灰白色，菌落周围培养基常扩散有水溶性色素的菌落时，进一步革兰染色为革兰阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验阳性者，即可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。

5.金黄色葡萄球菌：

该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种，能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致败血症。检测方法为取10mL待检液加到90mLSCDLP液体培养基中，置36℃培养24h，然后划线接种在Baird Parker氏培养基，置36℃培养48h，如有光滑，凸起，湿润，直径为2-4mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一浑浊带，在其外层有一透明圈的菌落，经革兰染色镜检，证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。

6.霉菌和酵母菌：

该项目用于判明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。检测方法为取待检样液2mL，分别注入两个灭菌平皿内，每皿1mL，将融化并冷至45℃的虎红培养基倾注到平皿内，每皿约15mL，随即转动平皿，待琼脂凝固后，翻转平皿，置28℃培养箱内培养72h后计数。